期刊简介
《药学服务与研究》杂志是由第二军医大学主管、第二军医大学长海医院主办的我国第一本有关药学服务的专业性学术期刊,国内外公开发行。主要报道药学的研究进展和实践信息。目前已成为中国科技论文统计源期刊、中国科技核心期刊,收录于美国《化学文摘》、俄罗斯《文摘杂志》、美国《国际药学文摘》、荷兰Elsevier文献数据库及国内大型数据库。
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首页>药学服务与研究杂志

- 杂志名称:药学服务与研究杂志
- 主管单位:第二军医大学
- 主办单位:第二军医大学
- 国际刊号:1671-2838
- 国内刊号:31-1877/R
- 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CA 化学文摘(美), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
人C型凝集素受体dectin-1单克隆抗体的制备
杨龙;王英;朱乐乐;姜远英;贾鑫明
关键词:C型凝集素受体, Dectin-1, 单克隆抗体
摘要:目的:克隆获得并原核表达人dectin-1基因的胞外段,以其作为抗原,制备人C型凝集素受体dectin-1的单克隆抗体.方法和结果:利用RT-PCR技术从人的外周血中克隆获得人dectin-1基因,克隆到pCDNA 3.0(+)载体中,获得pCDNA3.0(+)-dectin-1质粒.将dectin-1胞外段[dectin-1(202 bp-744 bp)]克隆到pET28a(+)载体,构建原核表达质粒pET28a(+)-dectin-1(202 bp-744 bp),转到大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)中,IPTG诱导目的片段原核表达,得到高效表达的dectin-1(202 bp-744 bp),镍柱亲和层析纯化后免疫BALB/c小鼠,取抗体滴度高的小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得1 5株阳性杂交瘤细胞株,利用有限稀释法进行单克隆杂交瘤细胞株的筛选,获得5株单克隆细胞株.用单克隆细胞株制备小鼠腹水模型,经辛酸-硫酸铵沉淀法纯化获得dectin-1的单克隆抗体.经蛋白质印迹法验证,此单克隆抗体能有效地识别人和小鼠的dectin-1蛋白.结论:成功制备获得dectin-1蛋白的特异、高效的单克隆抗体.
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